·Ö×ÓÉúÎïѧÕûÀí
2013/12/10
¸ù¾Ýÿ·ÝPPTºóµÄÀÏʦ¸øµÄÌâÄ¿ÕûÀíµÄ£¬¾Ý˵öλÔÓéÀֵǼÈë¿ÚÏÂÔØ²»³¬¹ýÄǸö·¶Î§£¬´ó¼ÒÈÏÕæ¸´Ï°£¬ÈôÓдíÎóµÄµØ·½£¬Çë»ý¼«ÅúÆÀÖ¸Õý£¡£¡£¡
µÚÒ»·ÝPPT
1. ·Ö×ÓÉúÎïѧ£ºÊÇÑо¿ºËËá¡¢µ°°×ÖʵÈÉúÎï´ó·Ö×ÓµÄÐÎ̬¡¢½á¹¹ÌØÕ÷¼°ÆäÖØÒªÐÔ¡¢¹æÂÉÐÔºÍÏ໥¹ØÏµµÄ¿ÆÑ§£¬ÊÇÈËÀà´Ó·Ö×ÓˮƽÉÏÕýʽ½ÒʾÉúÎï½çµÄ°ÂÃØ£¬Óб»¶¯µØÊÊÓ¦×ÔÈ»½çתΪÖ÷¶¯µØ¸ÄÔìºÍÖØ×é×ÔÈ»½çµÄ»ù´¡Ñ§¿Æ¡£
2. ÉúÎï´ó·Ö×Ó£¨ biomacromolecule £©£ºÖ÷Òª°üÀ¨ºËËᣨDNAºÍRNA£©¡¢µ°°×ÖÊ¡¢¶àÌǵȣ¬ÆäÖ÷ÒªÌØÕ÷ÊÇÓÉС·Ö×ӵĹ¹¼þ·Ö×Ó£¨È磺ºËÜÕËá¡¢°±»ùËá¡¢µ¥Ìǵȣ©×é³É£¬¾ßÓнϸ´ÔӵĿռä½á¹¹£¬¶øÇÒ¿Õ¼ä½á¹¹ÓëÆäÉúÎï»îÐÔÃÜÇÐÏà¹Ø¡£
3. DNAÖØ×é¼¼Êõ£¨ÓֳƻùÒò¹¤³Ì£©ÊÇÖ¸½«ÍâÔ´»ùÒòͨ¹ýÌåÍâÖØ×éºóµ¼ÈëÊÜÌåϸ°û£¬²¢Ê¹ÆäÄÜÔÚÊÜÌåϸ°ûÄÚ¸´Öƺͱí´ïµÄ¼¼Êõ¡£
4. ½á¹¹·Ö×ÓÉúÎïѧ£ºÑо¿ÉúÎï´ó·Ö×ÓÌØ¶¨µÄ¿Õ¼ä½á¹¹¼°½á¹¹µÄÔ˶¯±ä»¯ÓëÆäÉúÎïѧ¹¦ÄܹØÏµµÄѧ¿Æ¡£
5. »ùÒò×飨Genome£©£ºÊÇÉúÎïÌåÄÚÒÅ´«ÐÅÏ¢µÄ¼¯ºÏ£¬ÊÇij¸öÌØ¶¨ÎïÖÖϸ°ûÄÚÈ«²¿DNA·Ö×ÓµÄ×ܺ͡£
6. »ùÒò×鼯»®£¨ genome project£©£ºÒÔ»ñµÃijÎïÖÖ»ùÒò×éÈ«ÐòÁÐΪÖ÷ҪĿ±êµÄ¿ÆÑ§¼Æ»®¡£
7. »ùÒò×éѧ£¨genomics£©£ºÊÇÖ¸Ñо¿»ùÒò×é½á¹¹ºÍ¹¦ÄܵĿÆÑ§£¬°üÀ¨»ùÒò×é×÷ͼ¡¢ºËÜÕËáÐòÁвⶨ¡¢»ùÒò¶¨Î»¼°»ùÒò¹¦ÄÜ·ÖÎöµÈ¡£
8. ½á¹¹»ùÒò×éѧ£¨structural genomics£©£ºÒÔÈ«»ùÒò×é²âÐòΪĿ±ê£¬ÒÔ½¨Á¢ÉúÎïÌå¸ß·Ö±æÂÊÒÅ´«¡¢ÎïÀíºÍת¼ͼÆ×ΪÖ÷¡£
9. ¹¦ÄÜ»ùÒò×éѧ£¨functional genomics£©£ºÒÔ»ùÒò¹¦Äܼø¶¨ÎªÄ¿±ê£¬¸ù¾Ý½á¹¹»ùÒò×éѧÌṩµÄÐÅÏ¢£¬ÒÔ¸ßͨÁ¿¡¢´ó¹æÄ£µÄʵÑé·½·¨£¬½èÖú¼ÆËã»ú·ÖÎö£¬ÏµÍ³µØ¶Ô»ùÒò¹¦ÄܽøÐÐÚ¹ÊÍ¡£
10. ÉúÎïÐÅϢѧÊÇÒÔÉúÎï´ó·Ö×ÓΪÑо¿¶ÔÏó£¬ÒÔ¼ÆËã»úΪ¹¤¾ß£¬ÔËÓÃÊýѧºÍÐÅÏ¢¿ÆÑ§µÄ¹Ûµã¡¢ÀíÂۺͷ½·¨È¥Ñо¿ÉúÃüÏÖÏó£¬×éÖ¯ºÍ·ÖÎö³ÊÖ¸Êý¼¶Ôö³¤µÄÉúÎïÐÅÏ¢Êý¾ÝµÄÒ»ÃÅ¿ÆÑ§¡£
- ʲôÊÇ·Ö×ÓÉúÎïѧ£¿ÆäÑо¿¶ÔÏóÊÇʲô£¿
·Ö×ÓÉúÎïѧ£ºÊÇÑо¿ºËËá¡¢µ°°×ÖʵÈÉúÎï´ó·Ö×ÓµÄÐÎ̬¡¢½á¹¹ÌØÕ÷¼°ÆäÖØÒªÐÔ¡¢¹æÂÉÐÔºÍÏ໥¹ØÏµµÄ¿ÆÑ§£¬ÊÇÈËÀà´Ó·Ö×ÓˮƽÉÏÕæÕý½ÒʾÉúÎïÊÀ½çµÄ°ÂÃØ£¬Óɱ»¶¯µØÊÊÓ¦×ÔÈ»½çתÏòÖ÷¶¯µØ¸ÄÔìºÍÖØ×é×ÔÈ»½çµÄ»ù´¡Ñ§¿Æ¡£
• Ñо¿¶ÔÏó£ºÉúÎï´ó·Ö×Ó£¨ biomacromolecule £©£ºÖ÷Òª°üÀ¨ºËËᣨDNAºÍRNA£©¡¢µ°°×ÖÊ¡¢¶àÌǵȣ¬ÆäÖ÷ÒªÌØÕ÷ÊÇÓÉС·Ö×ӵĹ¹¼þ·Ö×Ó£¨È磺ºËÜÕËá¡¢°±»ùËá¡¢µ¥Ìǵȣ©×é³É£¬¾ßÓнϸ´ÔӵĿռä½á¹¹£¬¶øÇÒ¿Õ¼ä½á¹¹ÓëÆäÉúÎï»îÐÔÃÜÇÐÏà¹Ø¡£
- ÊÔ¾Ù³ö5Àý·Ö×ÓÉúÎïѧ·¢Õ¹Ê·ÉϵÄÖØÒª¿ÆÑ§Ê¼þ
¢Ù Charles Darwin½ø»¯ÂÛ£ºÎᄎÌìÔñ£¬ÊÊÕßÉú´æ
¢Ú Ê©Íúϸ°ûѧ˵£º¶¯Ö²Îï¶¼ÊÇÓÉϸ°û×é³ÉµÄ¡£
¢Û Gregor Mendel¾µäÒÅ´«Ñ§£ºÒÅ´«Òò×Ó
¢Ü Morgan»ùÒòѧ˵
¢Ý WatsonºÍCrickDNAË«ÂÝÐýÄ£ÐÍ£ºÀï³Ì±®
- ʲôÊÇDNAÖØ×é¼¼Êõ£¿ÓкÎÓ¦Óã¿
DNAÖØ×é¼¼Êõ£¨ÓֳƻùÒò¹¤³Ì£©ÊÇÖ¸½«ÍâÔ´»ùÒòͨ¹ýÌåÍâÖØ×éºóµ¼ÈëÊÜÌåϸ°û£¬²¢Ê¹ÆäÄÜÔÚÊÜÌåϸ°ûÄÚ¸´Öƺͱí´ïµÄ¼¼Êõ¡£
Ó¦Óãº
¢Ù »ù´¡ÀíÂÛÑо¿ÖеÄÓ¦ÓÃ
»ùÒò×é²âÐò
»ùÒò¶¨Î»
»ùÒò¹¦ÄÜÑо¿
»ùÒò±í´ïºÍµ÷¿ØÑо¿
¢Ú ¶àëÄÀࣨÈç¼¤ËØ¡¢¿¹ÉúËØ¡¢Ã¸ÀàºÍ¿¹ÌåµÈ£©²úÆ·µÄÉú²ú
΢ÉúÎï»ùÒò¹¤³ÌÓë¶àëÄÀà²úÆ·µÄÉú²ú
ת»ùÒò¶¯ÎïÓëµ°°×Ò©ÎïµÄÉú²ú
ת»ùÒòÖ²ÎïÓëµ°°×Ò©ÎïµÄÉú²ú
¢Û ת»ùÒò¶¯ÎïÓëÈËÀàÆ÷¹ÙÒÆÖ²
¢Ü ÎïÖÖ¸ÄÁ¼——ת»ùÒò¶¯Ö²Îï¡¢¹¤³Ì΢ÉúÎï
4. ʲôÊǽṹ·Ö×ÓÉúÎïѧ£¿
½á¹¹·Ö×ÓÉúÎïѧÊÇÑо¿ÉúÎï´ó·Ö×ÓÌØ¶¨µÄ¿Õ¼ä½á¹¹¼°½á¹¹µÄÔ˶¯±ä»¯ÓëÆäÉúÎïѧ¹¦ÄܹØÏµµÄ¿ÆÑ§¡£
ÄÚÈÝ£º½á¹¹²â¶¨¡¢½á¹¹Ô˶¯±ä»¯¹æÂÉ̽Ë÷¡¢½á¹¹Ó빦ÄܹØÏµ
ÊֶΣºX-ÉäÏßÑÜÉä¾§Ìåѧ£¨µ°°×Öʾ§Ìåѧ£©¡¢¶þά»ò¶àάºË´Å¹²ÕñÑо¿ÒºÏà½á¹¹¡¢µç¾µÈýÎ¬ÖØ×é¡¢µç×ÓÑÜÉä¡¢ÖÐ×ÓÑÜÉäºÍ¸÷ÖÖÆµÆ×ѧ·½·¨¡£
µÚ¶þ·ÝPPT·Ö×ÓÉúÎïѧÑо¿·¨
ºËË᣺ÊÇÒÅ´«ÐÅÏ¢µÄЯ´øÕߣ¬ÊÇ»ùÒò±í´ïµÄÎïÖÊ»ù´¡(°üÀ¨DNAÓëRNA)
SDSÁѽⷨ£º½«Ï¸¾úÐü¸¡ÓÚµÈÉøµÄÕáÌÇÈÜÒºÖУ¬ÓÃÈܾúøºÍEDTA´¦ÀíÒÔÆÆ»µÏ¸°û±Ú£¬È¥±Úϸ¾úÔÙÓÃSDSÁѽ⣬´Ó¶øÎº͵ØÊÍ·ÅÖÊÁ£DNAµ½µÈÉøÒºÖУ¬È»ºóÓ÷Ó/Âȷ³éÌᣬÒÒ´¼ ³Áµí¡¢Ï´µÓÖÊÁ£DNA¡£
Ó«¹â¹â¶È·¨£ºÓÃEBµÈÓ«¹âȾÁÏʾ×ٵĺËËáµçÓ¾½á¹û¿ÉÅж¨ºËËáÖÆÆ·µÄ´¿¶È¡£DNA·Ö×Ó½ÏRNA ´óµÃ¶à£¬µçÓ¾Ç¨ÒÆÂʵ͡£
×ÏÍâ·Ö¹â¹â¶È·¨£º¸Ã·¨Ö÷Ҫͨ¹ýA260ÓëA280µÄ±ÈÖµÀ´Åж¨ÓÐÎÞµ°°×ÖʵÄÎÛȾ¡£ÔÚTE»º³åÒºÖУ¬´¿DNAµÄA260/A280Ϊ1.8£¬´¿RNAµÄ±ÈֵΪ2.0¡£±ÈÖµÉý¸ßÓë½µµÍ¾ùÌáʾ²»´¿¡£
²£°ô²øÈÆ·¨£ºÁ½¸ö¹Ø¼ü²½Ö裬һÊÇ»ùÒò×éDNA³ÁµíÔÚϸ°ûÁѽâÒººÍÒÒ´¼µÄ½»½çÃæ£»¶þÊǽ« DNA³Áµí²øÈÆÔÚ´ø¹³²£°ôÉÏ¡£´ø¹³²£°ô½«´óƬ¶ÎDNA´ÓÎÞË®ÒÒ´¼ÖÐ×ªÒÆÖÁpH8.0µÄTE »º³åÒºÖС£
ѹËéÓë½þÅÝ·¨£º½«º¬´ý»ØÊÕDNAÌõ´øµÄÄý½º¿éÇгö£¬ÓÃÎüÍ·»ò½ÓÖÖÕ뽫ÆäѹË飬ȻºóÒÔÏ´ÍÑ »º³åÒº½þÅÝ£¬Ê¹DNAÏ´ÍѳöÀ´¡£
¼îÁѽⷨ£ºÔÚNaOHÌṩµÄ¸ßpH£¨12.0¡«12.6£©Ìõ¼þÏ£¬ÓÃÇ¿ÑôÀë×ÓÈ¥¹¸¼ÁSDSÆÆ»µÏ¸°û±Ú£¬Áѽâϸ°û£¬ÓëNaOH¹²Í¬Ê¹ËÞÖ÷ϸ°ûµÄµ°°×ÖÊÓëȾɫÌåDNA·¢Éú±äÐÔ£¬ÊͷųöÖÊÁ£DNA¡££¨¾¡ ¹Ü¼îÈÜÒºÄÜÆÆ»µDNAÖеļî»ùÅä¶Ô£¬µ«CCCÖÊÁ£DNAÒò²øÈƽôÃܶø²»Ò×½âÁ´£¬Ö»Òª²»ÔÚ ¼îÐÔÌõ¼þϱäÐÔÌ«¾Ã£¬µ±pHµ÷ÖÁÖÐÐÔʱ£¬CCCÖÊÁ£DNA¾Í¿ÉÖØÐ»ָ´ÌìÈ»µÄ³¬ÂÝÐý¡££©
ËáÐÔÒìÁòÇèËáëÒ-·Ó-ÂÈ·ÂÒ»²½·¨£ºÒÔº¬4mmol/LµÄÒìÁòÇèËáëÒÓë0.1mmol/LµÄβ-ÛÏ»ùÒÒ´¼ µÄ±äÐÔÈÜÒºÁѽâϸ°û£¬È»ºóÔÚpH4.0µÄËáÐÔÌõ¼þÏ£¬Ó÷Ó/Âȷ³éÌáÁѽâÈÜÒº£¬×îºóͨ¹ýÒì±û´¼³ÁµíÓë75%µÄÒÒ´¼Ï´µÓÀ´ÖƱ¸RNA¡£
±äÐÔ £ºÔÚijЩÀí»¯ÒòËØµÄ×÷ÓÃÏ£¬Î¬ÏµDNA·Ö×Ó¶þ¼¶½á¹¹µÄÇâ¼üºÍ¼î»ù¶Ñ»ýÁ¦Êܵ½ÆÆ»µ£¬ DNAÓÉË«ÂÝÐý±ä³Éµ¥Á´¹ý³Ì¡£
ÔöɫЧӦ£ºDNA±äÐÔʱÆäÈÜÒºOD260Ôö¸ßµÄÏÖÏó¡£
ÈÚ½âζȣ¨Tm£©£ºÔÚÈȱäÐÔ¹ý³ÌÖУ¬×ÏÍâÎüÊÕÖµ´ïµ½×î´óÖµµÄ50%ʱµÄζȳÆÎªDNAµÄ½âÁ´Î ¶È»òÈÚ½âζȡ££¨±¬·¢Ê½£ºÈȱäÐÔÊÇÔÚ±äÐÔζȷ¶Î§ÄÚÍ»·¢µÄÔ¾±ä¹ý³Ì£¬ºÜÏñ½á¾§´ïµ½ ÈÛµãʱµÄÈÚ»¯ÏÖÏ󣬹ÊÃûÈÚ½âζȡ£ÏÁÕÐÔ£º±äÐÔζȷ¶Î§ºÜС¡££©
¸´ÐÔ£ºÖ¸±äÐÔ DNA ÔÚÊʵ±Ìõ¼þÏ£¬¶þÌõ»¥²¹Á´È«²¿»ò²¿·Ö»Ö¸´µ½ÌìȻ˫ÂÝÐý½á¹¹µÄÏÖÏó£¬ËüÊDZäÐÔµÄÒ»ÖÖÄæ×ª¹ý³Ì¡£
ÍË»ð£ºÈȱäÐÔDNAÒ»°ã¾»ºÂýÀäÈ´ºó¼´¿É¸´ÐÔ£¬´Ë¹ý³Ì³ÆÖ®Îª“Í˻𔡣
ºËËá·Ö×ÓÔÓ½»:Á½ÌõDNAÁ´»òÁ½ÌõRNAÁ´»òÒ»ÌõDNAÁ´ºÍÒ»ÌõRNAÁ´°´¼î»ù»¥²¹µÄÔÔòµÞºÏ³ÉÒìÖÊË«Á´µÄ¹ý³Ì³ÆÎª·Ö×ÓÔÓ½»»òºËËá·Ö×ÓÔÓ½»¡££¨ÔÓ½»µÄ±¾ÖÊ£º¾ÍÊÇÔÚÒ»¶¨Ìõ¼þÏÂʹ»¥²¹ºËËáÁ´ÊµÏÖ¸´ÐÔ¡££©
ºËËá̽Õ룺ÊÇÖ¸ÄÜÓëÌØ¶¨ºËÜÕËáÐòÁз¢ÉúÌØÒìÐÔ»¥²¹ÔÓ½»£¬ÔÓ½»ºó¿ÉÓÃÌØÊâ·½·¨¼ì²âµÄ ÒÑÖª±»±ê¼ÇµÄºËËá·Ö×Ó¡£
cDNA(complementary DNA)£ºÊÇÖ¸ÓëmRNA»¥²¹µÄDNA·Ö×Ó¡£
¹ÌÏà·Ö×ÓÔÓ½»£ºÊǽ«´ý²âµÄ°ÐºËÜÕËáÁ´Ô¤Ïȹ̶¨ÔÚ¹ÌÌåÖ§³ÖÎïÉÏ£¬È»ºó·ÅÈ뺬Óбê¼Ç̽ÕëµÄ ÔÓ½»ÒºÖУ¬½øÐÐÔÓ½»·´Ó¦ºó£¬Ê¹ÔÓ½»·Ö×ÓÁôÔÚÖ§³ÖÎïÉÏ£¬¹Ê³Æ¹ÌÌåÔÓ½»¡£
ÔλÔÓ½»£ºÊÇÒÔÌØ¶¨±ê¼ÇµÄÒÑÖªÐòÁеĺËËá·Ö×Ó×÷Ϊ̽ÕëÓëϸ°û»ò×éÖ¯ÇÐÆ¬ÖкËËá½øÐÐÔÓ½» ²¢¶ÔÆä¼ì²âµÄ·½·¨
»ùÒòоƬ(gene chip)£ºÓÖ³ÆDNAоƬ£¨DNA chip£©»òDNA΢ÕóÁУ¨DNA microarray£©£¬ÊÇÖ¸ ¼¯³ÉÁË´óÁ¿DNAƬ¶ÎµÄ²£Á§Æ¬»òÏËάĤµÈÔØÌå¡£
ÎÊ´ð£º
1¡¢¼òÊöºËËá´¿»¯µÄÔÔòºÍÒªÇó¡£
ÔÔò£º±£³ÖºËËá¼î»ùÐòÁеÄÍêÕûÐÔ¡£
¾¡Á¿Çå³ýÆäËü·Ö×ÓµÄÎÛȾ£¬±£Ö¤ºËËáÖÆÆ·µÄ´¿¶È
ÒªÇó£ºÔÚÕû¸ö²Ù×÷¹ý³ÌÖÐÓ¦¾¡Á¿±ÜÃâ¸÷ÖÖÓк¦ÒòËØ¶ÔºËËáµÄÆÆ»µ¡£
1¡¢Î¶Ȳ»Òª¹ý¸ß(0-4¡æ) (¸ßÎÂÆÆ»µÇâ¼ü) £»
2¡¢¿ØÖÆpHÖµ·¶Î§(pH4-10) (¼«¶ËËá¼îÆÆ»µÁ×Ëá¶þõ¥¼ü) £»
3¡¢¼õÉÙÎïÀíÒòËØ¶ÔºËËáµÄ»úе¼ôÇÐÁ¦£»
4¡¢±£³ÖÒ»¶¨Àë×ÓÇ¿¶È¡£
ºËËá´¿¶ÈµÄÒªÇó
1¡¢ºËËáÑùÆ·Öв»´æÔÚ¹ý¸ßŨ¶ÈµÄ½ðÊôÀë×ӺͶÔøÓÐÒÖÖÆ×÷ÓõÄÓлúÈܼÁ£»
2¡¢ÆäËüÉúÎï´ó·Ö×ÓÈçµ°°×ÖÊ¡¢Ö¬ÀàºÍ¶àÌÇ·Ö×ÓµÄÎÛȾӦ½µÖÁ×îµÍ³Ì¶È£»
3¡¢ÅųýÆäËüºËËá·Ö×ÓµÄÎÛȾ£¬ÈçÌáÈ¡DNA·Ö×ÓʱӦȥ³ýRNA£¬ÌáÈ¡RNA·Ö×ÓʱӦ È¥³ýDNA¡£
2¡¢ËµÃ÷ºËËáÄý½ºµçÓ¾¼¼ÊõµÄÔÀíºÍÒªµã¡£
ÔÀí£ºÒ»ÖÖ·Ö×Ó±»·ÅÖõ½µç³¡ÖУ¬Ëü¾Í»áÒÔÒ»¶¨µÄËÙ¶ÈÒÆÏòÊʵ±µÄµç¼«¡£ÕâÖÖµçÓ¾·Ö×ÓÔڵ糡×÷ÓÃϵÄÇ¨ÒÆËÙ¶È£¬½Ð×öµçÓ¾µÄÇ¨ÒÆÂÊ£¬ËüÓëµç³¡Ç¿¶ÈºÍµçÓ¾·Ö×Ó±¾ÉíËùЯ´øµÄ¾»µçºÉÊý³ÉÕý±È£¬ÓëÆ¬¶Î´óС³É·´±È¡£
ÉúÀíÌõ¼þÏ£¬ºËËá·Ö×ÓÖеÄÁ×Ëá»ùÍųÊÀë×Ó»¯×´Ì¬£¬´ø¸ºµçºÉ£¬Ôڵ糡ÖÐÏòÕýµç¼«µÄ·½ÏòÇ¨ÒÆ¡£ÓÉÓÚÌÇ-Á×Ëá¹Ç¼ÜÔڽṹÉϵÄÖØ¸´ÐÔÖÊ£¬ÏàͬÊýÁ¿µÄË«Á´DNA¼¸ºõ¾ßÓеÈÁ¿µÄ¾»µçºÉ£¬Òò´Ë£¬Ç¨ÒÆÂÊÓëºËËá·Ö×Ó´óС³É·´±È¡£
Òªµã£ºÄý½ºÅ¨¶ÈµÄ¸ßµÍÓ°ÏìÄý½º½éÖÊ¿×϶µÄ´óС£¬Å¨¶ÈÔ½¸ß£¬¿×϶ԽС£¬Æä·Ö±æÄÜÁ¦¾ÍԽǿ¡£
µçÓ¾¼ø¶¨·½·¨£ºÓ«¹âȾÁÏä廯ÒÒ¶§£¨EB£©Ç¶Èë¼î»ùÆ½Ãæºó£¬±¾ÉíÎÞÓ«¹âµÄºËËáÔÚUV¼¤·¢Ï·¢³öºìɫӫ¹â¡£
3¡¢ÎªºÎ³ÁµíÊÇŨËõºËËáµÄ×î³£ÓÃÇÒ¸ßЧµÄ·½·¨£¿
¸Ä±äºËËáµÄÈܽ⻺³åÒº£»
ÖØÐµ÷ÕûºËËáµÄŨ¶È£»
È¥³ýÈÜÒºÖÐijЩÑÎÀë×ÓÓëÔÓÖÊ¡£
4¡¢¼òÊöºËËá¼ø¶¨µÄÒªµã¡£
1¡¢ºËËáŨ¶È¼ø¶¨
×ÏÍâ·Ö¹â¹â¶È·¨£º¸Ã·¨ÊÇ»ùÓÚºËËá·Ö×ÓÖеļî»ù¾ßÓй²éîË«¼ü½á¹¹Òò¶ø¿ÉÒÔÎüÊÕ×ÏÍâ Ïߣ¬Æä×î´óÎüÊÕ²¨³¤Îª260nm¡£
Ó«¹â¹â¶È·¨£ººËËáÔÚǶÈëEBºó£¬·¢³öºìɫӫ¹â£¬ÇÒÓ«¹âÇ¿¶ÈµÄ»ý·ÖÓëÈÜÒºÖкËËáµÄ º¬Á¿³ÊÕý±È¡£
2¡¢ºËËá´¿¶È¼ø¶¨
×ÏÍâ·Ö¹â¹â¶È·¨£º¸Ã·¨Ö÷Ҫͨ¹ýA260ÓëA280µÄ±ÈÖµÀ´Åж¨ÓÐÎÞµ°°×ÖʵÄÎÛȾ¡£ÔÚTE »º³åÒºÖУ¬´¿DNAµÄA260/A280Ϊ1.8£¬´¿RNAµÄ±ÈֵΪ2.0¡£±ÈÖµÉý¸ßÓë½µµÍ¾ùÌáʾ ²»´¿¡£
Ó«¹â¹â¶È·¨£ºÓÃEBµÈÓ«¹âȾÁÏʾ×ٵĺËËáµçÓ¾½á¹û¿ÉÅж¨ºËËáÖÆÆ·µÄ´¿¶È¡£DNA·Ö×Ó ½ÏRNA´óµÃ¶à£¬µçÓ¾Ç¨ÒÆÂʵͺËËá´¿¶È¼ø¶¨
3¡¢ÍêÕûÐÔ¼ø¶¨
ÇíÖ¬ÌÇÄý½ºµçÓ¾·¨£ºÒÔEBΪʾ×Ù¼ÁµÄºËËáÄý½ºµçÓ¾½á¹ûΪÒÀ¾Ý¡£
A¡¢»ùÒò×éDNAƬ¶ÎÈç·¢Éú½µ½â£¬µçӾͼ³ÊÍÏβ״¡£
B¡¢ÍêÕûµÄ»ò½µ½âºÜÉÙµÄ×ÜRNAµçӾͼÆ×ÖУ¬ÈýÌõ´øµÄÓ«¹âÇ¿¶È»ý·ÖÓ¦³ÊÌØ¶¨µÄ±ÈÖµ£¬ ÈçÓиıäÔòÌáʾÓÐRNAµÄ½µ½â¡£
C¡¢ÈôÔÚµãÑù¿×¸½½üÓÐ×ÅÉ«Ìõ´ø£¬Ôò˵Ã÷´æÔÚDNA µÄÎÛȾ¡£
5¡¢Ê²Ã´ÊÇ·Ó³éÌá·¨£¿Ê²Ã´ÊǼîÁѽⷨ£¿
·Ó³éÌá·¨£ºÒÔº¬EDTA¡¢SDS¼°ÎÞDNAøµÄRNAøÁѽ⻺³å񼮮Ëéϸ°û£¬¾µ°°×øK´¦Àí ºó£¬ÓÃpH8.0µÄTris±¥ºÍ·Ó³éÌáDNA£¬Öظ´³éÌáÖÁÒ»¶¨´¿¶Èºó£¬¸ù¾Ý²»Í¬ÐèÒª½øÐÐ͸Îö»ò³Áµí´¦Àí»ñµÃËùÐèµÄDNAÑùÆ·¡£
ÁѽâÒº³É·ÖµÄ×÷ÓãºEDTA£ºÀë×ÓòüºÏ¼Á£¬ÒÖÖÆDNase»îÐÔ£¬½µµÍϸ°ûĤÎȶ¨ÐÔ¡£
SDS£ºÈܽâϸ°ûĤ¡¢ºËĤ£¬È黯֬ÖÊ¡¢µ°°×£¬²¢Ê¹Æä±äÐÔ³Áµí£¬Í¬Ê±±äÐÔDNase¡£
ÎÞDNaseµÄRNase£º¿É¸ßЧˮ½âRNA¶ø±ÜÃâDNAµÄÏû»¯¡£
µ°°×øK£ºÏû»¯DNaseºÍ°ûÖеĵ°°×ÖÊ¡£
·Ó£º±äÐÔ³Áµíµ°°×£¬ÒÖÖÆDNase»îÐÔ¡£
pH 8.0µÄTris»º³åÒº£º±£Ö¤³éÌáʱDNA½øÈëË®Ï࣬·ÀÖ¹DNA±äÐÔ¡£
¼îÁѽⷨ£ºÔÚNaOHÌṩµÄ¸ßpH£¨12.0¡«12.6£©Ìõ¼þÏ£¬ÓÃÇ¿ÑôÀë×ÓÈ¥¹¸¼ÁSDSÆÆ»µÏ¸°û±Ú£¬Áѽâϸ°û£¬ÓëNaOH¹²Í¬Ê¹ËÞÖ÷ϸ°ûµÄµ°°×ÖÊÓëȾɫÌåDNA·¢Éú±äÐÔ£¬ÊͷųöÖÊÁ£DNA
6¡¢¼òÊöRNAÌáÈ¡µÄÒªµã¡£
RNA¼«Ò×±»RNaseË®½â£¬³ý°ûÄÚµÄRNaseÍ⣬Ëü»¹¹ã·º´æÔÚÓÚÈËµÄÆ¤·ô¡¢ÍÙÒº¡¢º¹Òº¼°ÖÜΧµÄ»·¾³ÖУ»RNase·Ö×ÓºÜÄÑʧȥ»îÐÔ£¬¶øÇÒÈÝÒ׸´ÐÔ£¬ÔÚRNAµÄÖÆ±¸¹ý³ÌÖУ¬ÅųýRNaseµÄÎÛȾ¼°Ç¿ÓÐÁ¦µØÒÖÖÆÆä»îÐÔÊÇRNAÖÆ±¸³É¹¦Óë·ñµÄ¹Ø¼ü¡£
ËáÐÔÒìÁòÇèËáëÒ-·Ó-ÂÈ·ÂÒ»²½·ÖÀë×ÜRNA
ËüÒÔº¬ÒìÁòÇèËáëÒ£¬β-Êè»ùÒÒ´¼ºÍÊ®¶þÍé»ù¼¡°±ËáÄÆµÄ±äÐÔÈÜÒºÁѽâϸ°û£¬È»ºóÔÚpH4.0µÄÌõ¼þÏ£¬Ó÷Ó/Âȷ³éÌáϸ°ûÁѽâÈÜÒº£¬×îºóͨ¹ýÒì±û´¼³ÁµíÓë75%µÄÒÒ´¼Ï´µÓ¶ø»ñµÃ×ÜRNA
7¡¢Ê²Ã´ºËËá±äÐÔ¡¢ºËËḴÐÔºÍÈÚ½âζȣ¿·Ö±ðÊÜÄÄЩÒòËØÓ°Ï죿
ºËËá±äÐÔ£ºÔÚijЩÀí»¯ÒòËØµÄ×÷ÓÃÏ£¬Î¬ÏµDNA·Ö×Ó¶þ¼¶½á¹¹µÄÇâ¼üºÍ¼î»ù¶Ñ»ýÁ¦ÊÜ µ½ÆÆ»µ£¬DNAÓÉË«ÂÝÐý±ä³Éµ¥Á´¹ý³Ì
Ó°ÏìÒòËØ£º·²ÄÜÆÆ»µË«ÂÝÐýÎȶ¨ÐÔµÄÒòËØ¶¼¿ÉÒÔ³ÉΪ±äÐÔµÄÌõ¼þ¡£È磺¼ÓÈÈ£¬¼«¶ËµÄpH
ÓлúÊÔ¼Á£¨¼×´¼¡¢ÒÒ´¼¡¢ÄòËØ¡¢¼×õ£°·µÈ£©
ºËËḴÐÔ£ºÖ¸±äÐÔ DNA ÔÚÊʵ±Ìõ¼þÏ£¬¶þÌõ»¥²¹Á´È«²¿»ò²¿·Ö»Ö¸´µ½ÌìȻ˫ÂÝÐý½á¹¹ µÄÏÖÏó£¬ËüÊDZäÐÔµÄÒ»ÖÖÄæ×ª¹ý³Ì¡£
Ó°ÏìÒòËØ£º1¡¢Î¶ȺÍʱ¼ä 2¡¢DNAŨ¶È 3¡¢DNA·Ö×Ó´óСºÍ¸´ÔÓ¶È 4¡¢Àë×ÓÇ¿¶È
ÈÚ½âζȣºÔÚÈȱäÐÔ¹ý³ÌÖУ¬×ÏÍâÎüÊÕÖµ´ïµ½×î´óÖµµÄ50%ʱµÄζȳÆÎªDNAµÄ½âÁ´ ζȻòÈÚ½âζȡ£
Ó°ÏìÒòËØ£º1¡¢DNA·Ö×Ó´óСºÍ¼î»ùµÄ×é³É 2¡¢ÈÜÒºµÄÀë×ÓÇ¿¶È 3¡¢pHÖµ 4¡¢±äÐÔ¼Á
8¡¢Ê²Ã´ÊǺËËá·Ö×ÓÔÓ½»£¿Æä±¾ÖÊÊÇʲô£¿
ºËËá·Ö×ÓÔÓ½»£ºÁ½ÌõDNAÁ´»òÁ½ÌõRNAÁ´»òÒ»ÌõDNAÁ´ºÍÒ»ÌõRNAÁ´°´¼î»ù»¥²¹µÄÔÔòµÞºÏ³ÉÒìÖÊË«Á´µÄ¹ý³Ì³ÆÎª·Ö×ÓÔÓ½»»òºËËá·Ö×ÓÔÓ½»¡£
±¾ÖÊ£ºÔÚÒ»¶¨Ìõ¼þÏÂʹ»¥²¹ºËËáÁ´ÊµÏÖ¸´ÐÔ¡£¡¡¡¡
9¡¢Ê²Ã´ÊǺËËá̽Õ룿ÓÐÄÄЩÀàÐÍ£¿ÆäÉè¼ÆÐèÒª×ñÑÄÄЩÔÔò£¿
ºËËá̽Õ룺ÊÇÖ¸ÄÜÓëÌØ¶¨ºËÜÕËáÐòÁз¢ÉúÌØÒìÐÔ»¥²¹ÔÓ½»£¬ÔÓ½»ºó¿ÉÓÃÌØÊâ·½·¨¼ì²âµÄ ÒÑÖª±»±ê¼ÇµÄºËËá·Ö×Ó¡£
ÀàÐÍ£º»ùÒò×éDNA̽Õë cDNA̽Õë RNA̽Õë ¹ÑºËÜÕËá̽Õë
̽ÕëÉè¼ÆÔÔò£º
1¡¢Ì½Õ볤¶È£ºÒ»°ãÒªÇóÔÚ10¡«50bp¡£
2¡¢ G£¯Cº¬Á¿Îª40£¥¡«60£¥¡£
3¡¢ ̽Õë·Ö×ÓÖÐÓ¦±ÜÃ⻥²¹ÐòÁС£
4¡¢±ÜÃâͬһ¼î»ùÁ¬Ðø³öÏÖ£¬Ò»°ã²»ÄܶàÓÚ4¸ö£¬ÈçGGGG-»ò -CCCC-¡£
5¡¢½èÖú¼ÆËã»úÏàÓ¦Èí¼þÓëÒÑÖªµÄ¸÷ÖÖ»ùÒòÐòÁнøÐÐͬԴÐԱȽϡ£
10¡¢ÀíÏëµÄ̽Õë±ê¼ÇÎïÓ¦¾ßÓÐÊ²Ã´ÌØµã£¿
¼ì²âÎïÒªÁéÃô¡¢ÌØÒì¡¢Îȶ¨¡¢¼ò±ã¡£
±ê¼ÇÎïÓë̽Õë½áºÏºó£¬Ó¦²»Ó°ÏìÔÓ½»·´Ó¦£¬ÓÈÆäÊÇÔÓ ½»ÌØÒìÐÔ¡¢Îȶ¨ÐÔºÍTmÖµ¡£
±ê¼ÇÎï¶Ô»·¾³ÎÛȾС£¬¶ÔÈËÌåÎÞËðÉË£¬¼Û¸ñµÍÁ®¡£
±ê¼ÇÎï¶Ô¼ì²â·½·¨ÎÞ¸ÉÈÅ¡£
11¡¢¼òÊöºËËá·Ö×ÓÔÓ½»¼¼ÊõµÄÒ»°ãÁ÷³Ì¡£
̽ÕëÖÆ±¸¼°±ê¼Ç£¨Í¬Î»ËØ»ò·ÇÍ¬Î»ËØ£©
´ý²âºËËáÑùÆ·ÖÆ±¸£¨·ÖÀ룬´¿»¯£©
ÔÓ½»£¨ÒºÏ࣬¹ÌÏ࣬ÔλÔÓ½»£©
ÔÓ½»ºó´¦Àí£¨È¥µô·ÇÌØÒìÔÓ½»·Ö×Ó£©
ÏÔʾ½á¹û£¨ÏÔÉ«£¬·¢¹â£¬·ÅÉä×ÔÏÔÓ°£©
½á¹û·ÖÎö
12¡¢ÓÐÄÄЩ³£ÓõĺËËá·Ö×ÓÔÓ½»¼¼Êõ£¿Æä¼ì²â¶ÔÏó·Ö±ðÊÇʲô£¿

